Los sistemas de imagen THUNDER cuentan con la innovadora tecnología Leica para Computational Clearing. Elimina los desenfoques eficientemente y en tiempo real, lo que permite usar muestras vivas en 3D de forma significativa, con microscopios de fluorescencia basados en cámara. La elevada sensibilidad del sistema garantiza una fototoxicidad y un fotoblanqueo de campo amplio reducidos, es decir, un mejor rendimiento en condiciones óptimas.
Un buen rendimiento para conseguir mejores estadísticas y una mayor eficiencia en el flujo de trabajo
Automatice sus ensayos con cultivos celulares en 3D para estudiar eficientemente modelos de enfermedades de próxima generación. THUNDER le permite captar imágenes de volúmenes de muestras mayores, como organoides pulmonares, a gran velocidad. Además, la automatización minimiza la interacción con el usuario incluso en experimentos complejos.
El resultado es:
- datos precisos y fiables en menos tiempo;
- un mayor rendimiento;
- mejores estadísticas y resultados.
Cuantificación fiable de toda la retina del ratón con THUNDER
Los enfoques cuantitativos para el análisis de imágenes de la retina a menudo hacen hincapié en proporcionar descripciones completas de la morfología y la función de la retina. Las anomalías de la retina, así como las aplicaciones clínicas traslacionales, necesitan un flujo de trabajo fiable para reproducir el cribado del objetivo transgénico. Por lo tanto, la obtención de imágenes repetitivas de la morfología requiere una solución de sistema con resultados precisos que se puedan reproducir constantemente. Con el THUNDER Imager 3D Assay podrá visualizar claramente la morfología y contar de forma fiable detalles intracelulares, como la distribución de núcleos celulares en la retina.
Con un THUNDER Imager 3D Assay, tendrá las siguientes ventajas:
- Eliminación inmediata del fondo que le ayudará a visualizar más detalles intracelulares
- Mayor profundidad útil con una aproximación widefield
- Cuantificación fiable
- Listo para usar para su flujo de trabajo con análisis
Condiciones fisiológicas óptimas: mínima exposición a la luz
En cultivos celulares en 3D, para obtener resultados significativos es imprescindible observar la fisiología real. Es preferible investigar las células mientras estas se encuentran en un estado lo más parecido posible al natural, y para ello hay que optimizar las condiciones experimentales, p. ej., con una intensidad lumínica mínima y tiempos de exposición lo más reducidos posible.
El THUNDER Imager Live Cell y el 3D Cell Culture cumplen estos requisitos gracias a sus fuentes de luz LED de alta gama con bandas de excitación pequeñas y optimizadas. Incluso con una iluminación baja y tiempos de exposición reducidos, la cámara sCMOS de altas prestaciones proporciona imágenes con información significativa gracias a una eficiencia cuántica de hasta el 82 %.
Para minimizar aún más la exposición de la muestra a la luz, la iluminación se ajusta al tiempo de grabación real. El obturador de la cámara de la cámara se sincroniza con la fuente de luz LED Lumencor de alta velocidad (tiempo de cambio de 20 µs) para minimizar el fotoblanqueado.
Imagen a la velocidad de la vida: procesos celulares
La vida transcurre muy rápido, sobre todo para una célula. La mayoría de los experimentos de imagen de célula viva precisan de sistemas de alta velocidad.
El THUNDER Imager Live Cell y el 3D Cell Culture le proporcionan la potencia de los sistemas de fluorescencia basados en cámaras de alta sensibilidad sCMOS que visualizan el campo completo.
Además de su alta sensibilidad, el THUNDER Imager Live Cell y el 3D Cell Culture le permiten captar datos a una velocidad de hasta 90 fotogramas por segundo, lo que le permitirá observar procesos celulares rápidos. Capta imágenes sin señal fuera de foco muy rápidamente, incluso dentro de grupos de células tridimensionales. También puede documentar procesos rápidos, incluso durante experimentos de múltiples longitudes de onda, gracias a las ruedas de filtro externas de alta velocidad (<27 ms).
Mantenga un entorno adecuado mientras observa sus cultivos de célula viva
El THUNDER Imager Live Cell y el 3D Cell Culture tienen todo lo que necesita para mantener las células en un estado similar al natural. El incubador garantiza unas condiciones fisiológicas óptimas para los cultivos de células vivas, tales como estabilidad del sistema, humedad, temperatura y nivel de dióxido de carbono (pH).
Gracias al microdispensador de agua, puede utilizar un objetivo de inmersión para flujos de trabajo multipocillo incluso durante experimentos de larga duración. Los objetivos de inmersión en agua permiten captar más luz, lo que lleva a imágenes de células con un mayor contraste y resolución.
Experimentos maestros de time lapse en multiposición: seguimiento de los cambios celulares
El THUNDER Imager Live Cell y el 3D Cell Culture le ofrecen velocidad y fiabilidad para sus experimentos multipocillo con cultivos celulares en 3D. Por ejemplo, al registrar el crecimiento y desarrollo de esferoides y organoides, su velocidad y fiabilidad le permiten obtener resultados óptimos.
El seguimiento de los cambios celulares mediante precisos experimentos time lapse en multiposición se consigue con este THUNDER imager gracias a:
- La fiable corrección de la deriva gracias al Adaptive Focus Control (AFC)
- El autofoco por software, que compensa los cambios en la posición de la muestra
- Posicionamiento Z reproducible con una precisión de hasta 20 nm (enfoque en bucle cerrado)
Consiga más puntos de datos en menos tiempo con la nueva platina QUANTUM. Se mueve con rapidez y precisión (p. ej., 10 posiciones por segundo) a todas las posiciones con una excelente repetitividad (< ±0,25 µm), y sin vibraciones.
Adquisición de imagen rutinaria y fiable
El THUNDER Imager Live Cell y el 3D Cell Culture posibilitan una adquisición de datos fiable con un enfoque preciso que se mantiene en las células vivas en todo momento.
La imagen de célula viva a menudo resulta peliaguda, por la deriva, el cambio en la morfología o el crecimiento de las células. La deriva la provocan las vibraciones, el desplazamiento mecánico o las variaciones de temperatura. Tanto la deriva como los cambios en las células pueden reducir la fiabilidad de los datos de las imágenes captadas, pues el enfoque se convierte en un problema. Gracias al Adaptive Focus Control (AFC), el enfoque en bucle cerrado y el autofoco por software, el THUNDER Imager Live Cell y el 3D Cell Culture son fiables a la hora de mantener el enfoque para sus experimentos multipocillo.
Desarrollo del páncreas del pez cebra
El ensayo THUNDER Imager 3D Assay permitió una clara identificación de las células Alfa (GFP-verde) y Beta (mCardinal-rojo) dentro del páncreas de un pez cebra en desarrollo.
Tomando imágenes en los canales azul (Hoechst), verde (GFP) y rojo (mCardinal), esta pila z de 150 imágenes se completó con todos los canales en un minuto.
Las condiciones fisiológicas pueden mantenerse dentro de una muestra minimizando el fotoblanqueo, proporcionando imágenes de alto rendimiento y un alto rendimiento de datos, lo que conduce a una mejor eficiencia en el flujo de trabajo.
Documente y manipule su experimento de cultivo celular
Combine las imágenes no invasivas de THUNDER con técnicas de fotomanipulación, FRAP, FRET o ablación láser usando el Infinity Scanner. Manipule las células que estudia, o su entorno extracelular, con el flexible sistema de escaneo láser vectorial del Infinity Scanner.
Aquí, los dos vídeos muestran células MDCK que expresan mx1-GFP antes y después de aplicar THUNDER Instant Computational Clearing. Utilizando THUNDER, la expresión de la proteína mx1 se volvió mucho más identificable, y se pudo ablacionar con el Infinity Scanner.
Combine el THUNDER Imager 3D Cell Culture con el Infinity Scanner para documentar y manipular sus experimentos de cultivo celular.
Claridad y velocidad para la documentación de muestras sensibles
Combine la eliminación de señal fuera de foco del THUNDER con las ventajas del TIRF. Para procesos dinámicos en la superficie celular, la microscopía TIRF proporciona una excelente relación señal-fondo.
En estos dos vídeos se muestran células ins-1 que expresan la pro-insulina humana con GFP-GRINCH. Al añadir KCL al cultivo celular, las células productoras de insulina se despolarizan y se pueden ver residuos de insulina fusionándose con la membrana plasmática.
Con el THUNDER Imager Live Cell, en combinación con TIRF, podrá generar imágenes de sus muestras sensibles con un control excepcional de parámetros de claridad, velocidad y documentación.
